1 藥用植物組織培養(yǎng)的研究進展

  藥用植物組織培養(yǎng)是以現(xiàn)代生命科學為基礎，結合化學學科的科學原理，采用先進的生物工程技術手段，以藥用植物為研究對象，進行其組織器官的發(fā)生、培養(yǎng)和細胞融合、轉化以及次生代謝產(chǎn)物和藥材組培苗工廠化生產(chǎn)研究的一門新興的綜合性應用科學。運用組織培養(yǎng)技術不僅能有效地縮短育種及野生變家種的馴化周期，還能夠創(chuàng)造出更優(yōu)良品質新品種。1964年，羅士韋教授首先利用組織培養(yǎng)技術獲得了人參植株，自此以后，組織培養(yǎng)技術在藥用植物上的研究越來越多。目前經(jīng)離體培養(yǎng)獲得試管苗的藥用植物已達 200余種。例如，1996年，對鐵皮石斛的離體培養(yǎng)和快速繁殖做了大量的研究，部分地區(qū)的生產(chǎn)已經(jīng)走上了組培工廠化的道路。2001年，對珍稀瀕危野生藥用植物如川貝母、紫杉等采用組織培養(yǎng)的手段建立起無性繁殖系來對這些物種進行繁殖和保存。許多研究人員利用體細胞胚加上人工胚乳成功地獲得了高產(chǎn)優(yōu)質的人工種子，如三七、鐵皮石斛等，還有許多研究人員對不同的藥用植物的器官、組織進行離體培養(yǎng)，建立了試管苗體外快速繁殖體系(如1995年，高山林等對徐長卿胚狀體的研究;1996年，對栝樓腋芽的試驗;1997年，尹東等對虎眼萬年青子鱗莖的研究;1998年，周延清等對芫荽腋芽的研究)。近年來，枸杞、西洋參等也通過誘導細胞或愈傷組織分化不定芽、形成試管苗植株。黃連等通過離體培養(yǎng)建立無性繁殖系并得到人工種苗。百合也通過細胞或組織經(jīng)過原球莖分化出植株。甘草、人參、三七經(jīng)過球形胚期、心形胚期、魚類胚期、子葉胚期形成成熟的類胚體后，繼續(xù)形成新的胚狀體。2006年，用半夏的的下塊莖和不定芽成功誘導出愈傷組織，三周后愈傷組織分化出大量的叢生芽并誘導出根，獲得半夏的試管苗植株。這些研究為藥用植物組織培養(yǎng)技術的應用奠定了堅實的理論基礎和實踐指導意義。

  2 丹參的形態(tài)特征與生物學性狀

  丹參為多年生草本植物。莖高40～80 cm。葉常為單數(shù)羽狀復葉;小葉3～7片，卵形或橢圓狀卵形。輪傘花序6至多花，組成頂生或腋生的假總狀序，密生腺毛或柔毛;苞片披針形;花萼紫色，二唇形;花冠藍紫色，筒內有毛環(huán)，上唇鐮刀形，下唇短語上唇，3裂，中間裂片很大。花期4～6月份，果期7～8月份。

  丹參的根莖短粗，頂端有時殘留莖基。根數(shù)條，長圓柱形，略彎曲，有的分枝并具有須根，長10～20 cm，直徑0.3～1.0 cm，表面棕紅色或暗棕紅色，粗糙，具縱皺紋。質硬而脆，斷面疏松，有裂隙或略平整而致密，皮部棕紅色，木部紫褐色，導管束黃白色，呈放射狀排列。

  丹參喜溫和氣候，在土質肥沃、疏松、通氣性較好的砂質土壤中適宜種植。野生種的丹參多見于山坡、草叢、溪谷邊、路邊、林緣等陽光充足且較濕潤的地方。丹參主要分布于遼寧、河北、河南、山東、山西、江蘇、湖北、甘肅、四川等省區(qū)。

  3 丹參組培快繁研究現(xiàn)狀

  我國各地的丹參品種由于各種原因出現(xiàn)混雜現(xiàn)象，丹參的品質及其產(chǎn)量均不穩(wěn)定。丹參的生長周期較長，且在栽培中丹參產(chǎn)量及品質降低，因而近年來對丹參的研究除了研究其活性成分及其藥理作用外，丹參的離體培養(yǎng)研究方面也有較多研究成果。

  以丹參種子建立無菌體系，研究結果顯示MS培養(yǎng)基利于丹參無菌苗葉片產(chǎn)生大量叢生芽，0.5～1.0 mg/L 6-BA芽誘導效果好。用丹參莖尖為材料，切取 5 cm帶頂芽的莖段，經(jīng)滅菌后，剝取莖生長點約 1 mm，接種于 MS培養(yǎng)基中，經(jīng)生長、分化，1年可快速繁殖出丹參優(yōu)質種苗 10萬～20萬株。以葉片、葉柄為外植體在MS附加6-BA 2 mg/L的培養(yǎng)基上形成叢生苗，叢生苗切下在l/2 MS培養(yǎng)基上可長出根，育成完整植株，移栽土中能夠存活。陳巍等人研究了蔗糖濃度、pH值、接種量、生長調節(jié)劑等對丹參不定根的生長及根中丹參酮ⅡA含量的影響，為提高丹參的產(chǎn)量及藥用成分含量的研究奠定了基礎。

  2003年，研究了南丹參叢生芽的誘導及其多倍體誘導以及秋水仙素對丹參不同外植體的誘導效應。張蔭麟等人將發(fā)根農桿菌去感染丹參毛狀根，研究證明農桿菌的Ri-質粒的T-DNA直接轉化到丹參細胞DNA中，且毛狀根的增殖倍數(shù)遠遠超過了常規(guī)的增殖速度。成功篩選出丹參株系 C1，該株系不僅產(chǎn)量高，且其藥用成分丹參酮的含量比普通植株高出近一倍。

  以白花丹參的幼嫩葉片和葉柄作為外植體,接種至器官發(fā)生分化培養(yǎng)基上誘導叢生芽,然后作壯苗培養(yǎng),繼而生根培養(yǎng),建立了一套快速再生體系。 郭肖紅等研究了 MS、LS、B5、White和 SH 培養(yǎng)基對丹參不定根培養(yǎng)的影響，根據(jù)不定根生長速率和有效成分的量，確定MS為基本培養(yǎng)基。研究顯示，以丹參的幼莖、幼葉、花蕾為外植體誘導愈傷并再生植株，其中以幼莖為外植體效果很佳。以丹參幼苗作為試驗材料，研究了不同的光質(W白光，R紅光，B藍光)對丹參幼苗生長的影響以及對其有效藥用成分的積累以及相關代謝酶活性的影響。

  丹參快速繁殖應用于生產(chǎn)，關鍵在于提供高效、低成本的生產(chǎn)用苗。這些關于丹參的快速繁殖的研究，為丹參的快繁技術應用生產(chǎn)打下了一定的基礎。

  4 展望

  植物組織培養(yǎng)技術的興起和現(xiàn)代科研育種手段的有機結合，為我國稀缺瀕危藥用植物的生產(chǎn)、研究和發(fā)展提供了良機和手段，在一定程度上極大地推動了我國及世界中藥行業(yè)的前進與發(fā)展，為解決藥源質量與品質奠定了堅實的理論基礎和技術支撐，為廣大人民群眾減低用藥成本提供了一定的可能性。