2、溫度處理操作和培養過程都是在恒溫條件下進行，一般在23—27℃之間，熱帶植物可偏高些，脫毒植物需要高溫處理。

  3、光照處理植物的器官必須有光，某些植物器官的生成是在無光條件下，但它的生長和發育必須有光。莖尖的生長及試管苗的繼代增殖以3000-5000lux光照強度適宜;生根試管苗以3000lux適宜。光質對愈傷組織誘導、增殖、器官的分化有不同的影響。光周期誘導一般是16h，黑暗是12h，對光周期敏感植物要掌握光照時間，否則影響植物的分化。

  4、培養基的酸堿度因植物的種類不同而有區別，大多數植物要求在5.8之間，喜酸性培養的植物要求的酸堿度較嚴格。