正常的組培苗應當葉色濃綠、植株粗壯;如果在增殖階段出現芽苗瘦弱、徒長或節間過長,這種苗轉入生根培養時能夠生根,在環境條件較好的情況下,也會稍轉粗壯,但總體看來,苗的株型、葉色、葉片大小等性狀還是差于生長正常的增殖苗...
正常的組培苗應當葉色濃綠、植株粗壯;如果在增殖階段出現芽苗瘦弱、徒長或節間過長,這種苗轉入生根培養時能夠生根,在環境條件較好的情況下,也會稍轉粗壯,但總體看來,苗的株型、葉色、葉片大小等性狀還是差于生長正常的增殖苗。
有時即便是正常或健壯的增殖苗,若生根階段培養基不適宜或培養的環境條件得不到保障,往往根原基及根還未形成,就很快表現出小苗徒長,節間明顯伸長,葉片變細、變薄、變嫩并出現黃化。這樣的苗進行過渡培養時,會出現萎蔫和爛根,很容易死亡,過渡成活率極低。
組培苗瘦弱的原因
1、細胞分裂素濃度過高,產生了過多的不定芽,這些密集的芽若不及時進行轉移和分切,很快就開始變成瘦弱苗。
2、溫度過高,高溫有利于苗的生長,多數品種適宜的溫度是25℃左右,在過高的溫度條件下,苗木的伸長速度快,對于一些有節間的品種如香石竹、滿天星、菊花等,組培苗會變得特別瘦弱。對一些無節間種類如非洲菊、勿忘我、情人草等的影響相對小一些,主要是葉片變薄、變長。
3、光照不足,組培苗會變黃、變弱、變細并加速生長,使苗在短時間內變得更瘦弱。
4、培養基水分過多,在瓊脂含量不足會引起植株徒長變弱。但對于情人草這類生長速度慢,又不容易引起玻璃化的種類,適當的高溫高濕又可促進苗的快速生長。
5、通氣不良,在使用不透氣膜時,會增加瓶內濕度,從而使苗表現嫩弱。
6、以上因素同時出現時,對苗的不良影響明顯大于單一因素,各個因素之間相互促進又相互制約。因此控制瘦弱苗,培養粗壯苗應通過多個因素共同調節才可能獲得理想的效果。
減少、避免組培苗徒長和瘦弱的產生,應考慮的因素
1、根據品種特點減少細胞分裂素用量,加速繼代轉瓶的速度,適當降低接種密度。
2、利用空調降低培養室溫度。
3、提高光照強度和延長光照時間,充分利用較強的自然光做光源,調整擺放位置和密度。
4、調整培養基硬度,改用透氣膜做封口,進行培養基及環境因子的綜合調控,力求獲得最優質健壯的組培瓶苗。
組培苗的生長環境
組培苗和一般的田間幼苗不同,試管苗長期生長在培養容器中,與外界環境隔離,形成了一個恒溫、高濕、弱光、無菌的獨特生態環境。
恒溫
在組培苗整個生長過程中,常采用恒溫培養,即使某一階段稍有變動,溫差也是極小的。而外界環境中的溫度由太陽輻射的日輻射量決定,處于不斷變化之中,溫差較大。
高濕
組織培養中培養容器內的水分移動有兩條途徑,一是組培苗吸收的水分,從葉面氣孔蒸發;二是培養基向外蒸發,而后又凝結進入培養基的水分。循環的結果會使培養容器內相對濕度接近于100%,遠遠大于培養容器外的空氣濕度。
弱光
組織培養中采取人工補光,其光照強度遠不及太陽光,組培苗生長較弱,移栽后經受不了太陽光的直接照射。
無菌
組培苗所在環境是無菌的。不僅培養基無菌,而且試管苗也無菌。在移栽過程中組培苗要經歷由無菌向有菌的轉換。
組培苗的特點
組培苗的根系不發達,有些不容易生根的植物有時只能形成1-2條根,而且經常沒有側根和根毛。有些愈傷組織上產生的根沒有和維管束相連接,這種根基本上沒有吸收和運輸水分和無機鹽的能力。
組培苗葉片幼嫩,葉片表面角質層或蠟質層不發達,因此水分蒸發快,很容易失水萎蔫 ,一般的葉片正面有角質層或蠟質層,背面多有茸毛,葉背面氣孔有很多毛可以保護氣孔,減少水分蒸發。而組培苗表皮基本沒有茸毛,所以水分蒸發量大。組培苗的細胞排列疏松,細胞間隙大,容易失水。
組培苗的機械組織發育較差,莖桿嫩而不堅挺,在缺水時易萎蔫和倒伏。
地煉組培苗
因為組培苗在培養瓶中與溫室的條件差別很大,主要是培養瓶中的溫度恒定、濕度高、光照較弱等。為了使組培苗適應移栽后的環境并進行自養,必須要有一個逐步鍛煉和適應的過程,這個過程叫馴化或煉苗。煉苗的目的在于提高組培苗對外界環境條件的適應性、提高其光合作用的能力、促使組培苗健壯、最終達到提高組培苗移栽成活率的目的。
組培苗從試管或組培瓶內移到外界,由異養變為自養,由無菌變為有菌,由恒溫、高濕、弱光向自然變溫、低濕、強光過渡,變化十分劇烈。馴化應從溫度、濕度、光照及有無菌等環境要素進行,馴化開始數天內,應和培養時的環境條件相似,馴化后期,則要與移栽的條件相似,從而達到逐步適應的目的。
常規的煉苗程序
閉瓶強光煉苗
當生根后或根系得到基本發育后(生根培養7~15天),將培養瓶移到室外遮陰棚或溫室中進行強光閉瓶煉苗7-20天左右,遮明度為50%-70%。
開瓶強光煉苗
將培養容器的蓋子打開,在自然光下進行開瓶煉苗3-7天,正午強光或南方光照較強的地區應該注意要采取遮陰措施,如用遮陰棚或溫室避免灼傷小苗。如果在培養容器中開蓋培養不夠1周,一般不會引起含蔗糖培養基的污染問題。開瓶煉菌可以分階段進行,即首先開蓋一兩天,然后部分開蓋一兩天,然后完全揭去蓋。這種方法在相對濕度十分低的屋內特別有好處。培養容器的開口大小也影響開蓋的速度,開口大的瓶蓋應比開口小的瓶蓋除去的速度慢一些。
煉苗的方法一般都是靠一些經驗,需要經過不斷的摸索積累經驗。一般的方法就是將培養試管苗的容器帶封口材料移到溫室,開始保持與培養室比較接近的環境條件,適當遮光,提高溫度,以后逐漸去掉培養瓶的蓋子,使瓶子中光照條件接近生長環境,然后松開并去除封口材料,使試管苗逐步適應環境條件。
馴化成功的標準是試管苗莖葉顏色加深。