捕蠅草又名蒼蠅夾,是食蟲植物茅膏菜科內的捕蠅草屬,為多年生草本。植株秀麗別致,它能散發出對昆蟲有誘惑性的芳香,可引誘昆蟲前來并捕抓,而后由葉面的紫紅色腺體分泌消化液將昆蟲分解并吸收,是一種很有趣的小型食蟲植物。在歐美常用來盆栽觀賞。由于捕蠅草有一對可開合的捕蟲葉片,具有十分明顯的捕蟲特征,且葉色鮮紅,是優良的珍奇觀賞花卉及學校生物課的植物活教材,因此十分受歡迎被廣泛栽培,目前美國、荷蘭等國均已產業化生產供應市場。
捕蠅草常規用葉片扦插,子芽分植等無性方法繁殖。由于葉片扦插成活率低,植株萌芽能力較差,滿足不了市場的需求,而應用組培技術可以較快獲得大量的幼苗。目前,國內有關捕蠅草組織培養研究報道較少,本文通過試驗實踐,總結出了一套捕蠅草的實用組培快繁技術,并在企業形成規模化生產,品質良好,產品出口到荷蘭,取得較好的經濟效益。
1 試驗材料和方法
取荷蘭來捕蠅草的種子,用自來水清洗干凈,后用70%的酒精浸潤約0.5 min,無菌水沖洗2~3次。用0.1%升汞消毒0.5~1 min,無菌水沖洗3~5次,濾干水后接種至MS+6-BA 0.1 mg/L的培養基中。約30天后出現愈傷組織,將愈傷組織接種至1/2MS的培養基中,經30天后出現叢狀小芽,叢狀小芽分切成2~3個芽/團繼代培養。
以上培養基均含蔗糖3%,卡拉膠0.75%,pH值5.5,培養溫度22~24℃,光照10~12 h/天,光強1 500~2 000 lx。
2 結果與分析
2.1 愈傷組織的誘導
將備好的種子5個一團為1個增殖單位接種到誘導愈傷試驗培養基中。共4個處理。基本培養基為MS,每升分別添加細胞分裂素2IP 0.3 mg、6-KT 0.3 mg、6-BA 0.1 mg、6-BA 0.3 mg。根據觀察,試驗結果如下:捕蠅草種子對三種細胞分裂素均敏感,但KT和2ip形成愈傷比率稍低,且KT有少量玻璃化現象。而6-BA又以0.1 mg/L為好,所形成愈傷比例較高且無玻璃化現象,質量好。含6-BA 0.3 mg/L的培養基雖形成愈傷比率高,但其愈傷呈現很高比例的玻璃化,質量不好。因此,愈傷組織誘導以MS添加細胞分裂素6-BA 0.1 mg/L培養基好。
2.2 芽的誘導
把愈傷組織分成約0.3 cm大小的塊狀,分別接入以下誘導芽的試驗培養基中,共9個處理。三個處理基本培養基為MS,每升分別添加細胞分裂素0、2IP 0.05 mg、6-KT 0.05 mg。三個處理基本培養基為1/2MS,添加細胞分裂素同上。另三個處理基本培養基為1/8MS,添加細胞分裂素也同上。根據觀察,試驗結果如下:以MS為基本培養基的愈傷組織都有玻璃化現象,添加了細胞分裂素的更嚴重。以1/8MS為基本培養基的愈傷組織都有死亡現象,添加了細胞分裂素的還有玻璃化現象。以1/2MS為基本培養基未添加細胞分裂素的愈傷組織正常,誘導的小芽多且生長好,植株挺拔。但添加了細胞分裂素的有玻璃化現象。綜上分析,愈傷誘導芽的培養1/2MS基本培養基優于MS和1/8MS兩種基本培養基,又以1/2MS基本培養基且不添加任何細胞分裂素為很佳。
2.3 芽的增殖
將誘導出的小芽叢分成2~3個芽/團,轉入各增殖試驗培養基中,共8個處理。基本培養基四個處理為1/2MS,另四個處理為1/8MS。每升分別添加細胞分裂素2IP 0.01 mg、2IP 0.03 mg、6-KT 0.01 mg、6-BA 0.01 mg和生長素IAA 0.01 mg.以40天為一個周期續代一次可產生3~5個子芽。根據觀察:用1/2MS為基本培養基的處理芽團表現葉色綠,子芽多且植株高大粗壯,長勢好。用1/8MS為基本培養基的處理芽團表現葉色顏色鮮紅,但子芽較少且植株偏矮小,長勢較差。細胞分裂素中以添加2ip 0.03為很好,用6-BA和6-KT雖然子芽多,但會導致葉片皺縮不舒展且葉片明顯縮小,表現不正常。綜上分析,1/2MS添加2IP 0.03 mg/L和IAA 0.01 mg/L處理培養基用于芽團在增殖擴繁很好,芽多苗大且無皺縮芽,但葉片雖大顏色卻偏綠,而客戶要求是苗大且葉片顏色鮮紅。嘗試在續代過程中用兩次1/2MS添加2IP 0.03 mg/L和IAA 0.01 mg/L的培養基后再用一次1/8MS添加2IP 0.03 mg/L和IAA 0.01 mg/L的培養基,達到了很好的效果:苗高大舒展,葉片又呈現鮮艷的紅色,客戶非常滿意。
2.4 根的誘導
將芽團中H>1.2 cm的粗壯單芽挑下,去除邊緣黑褐葉片接入四種生根試驗培養基中,培養基的基本母液為1/8MS,每升分別添加IAA 0.01,IAA 0.03,NAA 0.01,NAA 0.03和活性碳200 mg。經觀察,以每升添加IAA 0.03和活性碳200 mg的培養基為很佳。7~10天后根就開始萌動,20天后有100%的苗都生出2~3條長約0.5 cm的根,而且芽苗舒展,葉大色紅。
3 移植
將已生根的小苗放入蔭棚內煉苗10~15天,使其適應自然環境后將小苗從培養器皿中取出,洗去培養基移栽入1/3椰糠+2/3泥炭土的基質中,注意保溫保濕,小苗很快正常生長,成活率85%以上。
4 結語
1)在捕蠅草的組織培養中誘導愈傷以MS+6-BA 0.1 mg/L為好。從愈傷中誘導出芽以1/2MS不添加任何細胞分裂素為很佳。
2)在捕蠅草的繼代培養中,為保證生產出高大舒展,葉片又呈現鮮艷紅色的苗。采用兩種不同基本母液的培養基交替使用,達到了很好的效果。
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