1、外植體
外植體類型對(duì)植物的組織培養(yǎng)工作有著明顯的影響作用,是控制組培有效性的重要因素條件。在理論內(nèi)容上,植物中的各個(gè)組織器官,都可以在組織培養(yǎng)技術(shù)的支撐下完成生長(zhǎng)發(fā)育。但在大量的研究數(shù)據(jù)中,木本植物的不同外植體提取部位,與其整體植株的發(fā)育階段有著明顯的關(guān)聯(lián)性,會(huì)在不同的生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期,展現(xiàn)出差異化的特征表現(xiàn)。在對(duì)木本植物的外植體進(jìn)行采集的過程中,需根據(jù)具體的組織培養(yǎng)目標(biāo)、快繁方法、生物習(xí)性特征,對(duì)其外植體的類型進(jìn)行選擇。通常情況下,在木本觀賞植物的外植體選擇中,都會(huì)定位那些幼嫩的植物組織與器官,并在莖尖、嫩芽、幼葉、胚、子葉等結(jié)構(gòu)的采集中,保證技術(shù)應(yīng)用外植體的合理性使用狀態(tài)。同時(shí),針對(duì)一些特殊性的需求內(nèi)容,也會(huì)對(duì)植物的莖段、成熟葉片、根、花等具體器官進(jìn)行外植體采集。
例如,在對(duì)木本觀賞植物莖段與幼芽進(jìn)行誘導(dǎo)愈傷試驗(yàn)的處理過程中,可以在相同培養(yǎng)條件下形成對(duì)比分析。實(shí)際處理中,將幼芽作為外植體材料進(jìn)行愈傷處理,表現(xiàn)出較高的誘導(dǎo)率水平,并在快速生長(zhǎng)的愈傷組織中,明顯的優(yōu)于植物莖段結(jié)構(gòu)的愈傷組織生成。
另外,將蘋果作為具體的實(shí)驗(yàn)對(duì)比組,可以對(duì)其植株葉片進(jìn)行培養(yǎng)處理,并由此分析不同葉子生長(zhǎng)技術(shù)要素。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),相同條件的植物組織生長(zhǎng)培養(yǎng),葉梢位置的幼葉,有明顯的再生能力優(yōu)勢(shì);而在獨(dú)立葉片中,葉片中部的組織結(jié)構(gòu),有更強(qiáng)的生長(zhǎng)能力,并在葉片接近葉柄的位置,有較快的愈傷組織發(fā)展能力。
2、培養(yǎng)基
培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)過程中的基礎(chǔ)物質(zhì),是為被培養(yǎng)組織提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基本條件,不同培養(yǎng)基組成,對(duì)植物生長(zhǎng)有著明顯的影響效果。在大多數(shù)植物組織的培養(yǎng)中,通常會(huì)在培養(yǎng)基中加入無機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、有機(jī)添加物、碳源、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、凝膠凝劑等材料。
不同類型的植物,或是外植體材料,在培養(yǎng)基適應(yīng)能力上,也表現(xiàn)出明顯的差異性。在B5培養(yǎng)基中,莖段愈傷組織的誘導(dǎo)率,要明顯地優(yōu)于葉片;而在MS培養(yǎng)基中,這種優(yōu)勢(shì)條件就會(huì)發(fā)生互換,使葉片的誘導(dǎo)率高于莖段。
在對(duì)組織培養(yǎng)工作進(jìn)行控制的過程中,會(huì)針對(duì)不同的需要條件,對(duì)組織培養(yǎng)的階段與目標(biāo)進(jìn)行調(diào)整,在這一變化條件下,也會(huì)使培養(yǎng)基的基本成分發(fā)生變化。例如,在對(duì)毛葉棗進(jìn)行組織培養(yǎng)的過程中,對(duì)于驅(qū)動(dòng)與增殖階段,可以使用MS培養(yǎng)基,但需要在生根階段的培養(yǎng)中,將MS培養(yǎng)基縮減到50%的程度,才可以更好地完成制作培養(yǎng)。又如,在誘導(dǎo)銀杏莖段愈合的處理中,也可以應(yīng)用MS培養(yǎng)基,并將50%MS培養(yǎng)基應(yīng)用在分化芽階段,對(duì)于根部誘導(dǎo)與生成,則將培養(yǎng)基更換為White,以此保證整體培養(yǎng)流程的效率化條件。
3、激素
植物組培中,外源物質(zhì)激素中種類、質(zhì)量、配比是影響技術(shù)應(yīng)用條件的重要因素。在類型選擇上,植物生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、赤霉素、乙烯、脫落酸等常規(guī)的植物激素,都可以作為有效的應(yīng)用條件,對(duì)植物的組織生長(zhǎng)起到一定的刺激作用。同時(shí),也可以應(yīng)用到油菜素甾體等物質(zhì),對(duì)植物組培進(jìn)行調(diào)節(jié)。
木本觀賞植物的組織培養(yǎng)中,6-BA、ZT、KT、TDZ等物質(zhì),都是常見的細(xì)胞分裂素類激素。在此類的激素類物質(zhì)的刺激作用下,植物組織在組培過程中,會(huì)在分化與增殖的過程中,表現(xiàn)出明顯的優(yōu)化效果。以應(yīng)用最為廣泛的6-BA為例,在對(duì)野生荔枝種子進(jìn)行組織培育的過程中,在其培養(yǎng)基材料中,可以發(fā)現(xiàn)濃度高達(dá)20mg/L的6-BA激素物質(zhì),證明了此類激素對(duì)于分裂的影響作用。而相同類型的激素物質(zhì),也存在一定的差異性,以6-BA與KT為例,6-BA可以有效的促進(jìn)細(xì)胞的分裂狀態(tài),并在愈傷組織的形態(tài)建成中,起到了積極的作用。而KT對(duì)于愈傷組織則沒有明顯的影響條件,但將其添加到誘導(dǎo)培養(yǎng)基中后,可以對(duì)愈傷組織的生成質(zhì)量起到改善與優(yōu)化作用。
4、其他添加物
木本觀賞植物的組織培養(yǎng)處理中,必要時(shí)可以加入有機(jī)物質(zhì),作為外源添加物,以此提高組培的有效性。而對(duì)于椰子乳、谷氨酰胺、活性炭、青霉素、核黃素等添加物的使用,已經(jīng)成為了此類組培處理中的常態(tài)化技術(shù)。在實(shí)務(wù)操作中,為了對(duì)幼苗的生長(zhǎng)進(jìn)行強(qiáng)化,可以在其培養(yǎng)過程中,向培養(yǎng)基中加入適當(dāng)?shù)某嗝顾?而在向培養(yǎng)基中添加活性炭之后,可以提高生根苗的生長(zhǎng)質(zhì)量。因此,不同狀態(tài)類型的添加物質(zhì),會(huì)對(duì)植物的組織培養(yǎng)條件起到差異的積極影響作用。
5、培養(yǎng)環(huán)境
培養(yǎng)環(huán)境,由光照、溫度、濕度、時(shí)間、繼代次數(shù)等多種條件組成,對(duì)木本植物的組織培養(yǎng)工作,產(chǎn)生著不同條件的影響效果。例如,在對(duì)赤桉葉片進(jìn)行不定芽誘導(dǎo)組織培養(yǎng)的過程中,可以先進(jìn)行10d的暗環(huán)境培養(yǎng),然后再進(jìn)行每天16h的光暗交替培養(yǎng)。在這一交替條件下的培養(yǎng)效果,要明顯的優(yōu)于全光環(huán)境中的不定芽誘導(dǎo),而在暗培養(yǎng)過程中,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),會(huì)愈發(fā)縮減不定芽的誘導(dǎo)概率。由此,也體現(xiàn)出了光照條件下,培養(yǎng)環(huán)境對(duì)于組織培養(yǎng)有效性的影響。
而從溫度條件出發(fā),在不同的溫度環(huán)境中,也會(huì)對(duì)組織培養(yǎng)的效果造成影響。甚至在光、暗協(xié)調(diào)配合下的溫度周期,也會(huì)對(duì)整體組織培養(yǎng)工作造成影響。在此項(xiàng)技術(shù)理論的影響下,說明了培養(yǎng)環(huán)境各項(xiàng)影響因素的綜合性,并非獨(dú)立數(shù)據(jù)下的個(gè)體影響表現(xiàn),在各個(gè)影響要素之間,也存在著相應(yīng)的關(guān)聯(lián)性條件,最終匯聚在對(duì)于植物組織培養(yǎng)的影響效果中。
綜上,木本觀賞植物的組織培養(yǎng),是優(yōu)化組培技術(shù)應(yīng)用空間的重要條件,也是補(bǔ)充木本觀賞植物應(yīng)用空間的有效技術(shù)手段。通過對(duì)其基本技術(shù)理論內(nèi)容與應(yīng)用價(jià)值的介紹,在影響內(nèi)容中,說明此項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用條件,可以形成完整的技術(shù)指導(dǎo)條件,為整體技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用提供基礎(chǔ)性成長(zhǎng)動(dòng)力。
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