褐化
解決方案:在培養(yǎng)基中添加活性碳可以防止植物組織自身的酚類物質(zhì)排泌和變褐老化,對形態(tài)發(fā)生和器官形成有良好作用。一般認為,活性碳主要吸附非極性物質(zhì)及色素大分子,可以減少一些有害物質(zhì)的影響,但是具體吸附的選擇性很差,溫度低時吸附力增強,溫度高時吸附力減弱,甚至?xí)馕剑ǔJ褂脻舛葹?.5-10g/L。加入活性炭后使培養(yǎng)基變黑,對一些植物誘導(dǎo)生根有利。大量活性炭的加入會削弱瓊脂的凝固能力,因此要多加些瓊脂。很細的活性炭容易沉淀,因此通常在瓊脂將要凝固時,需輕輕搖動培養(yǎng)瓶。
酚污染
解決方案:植物外植體組織在接種時的切割面會溢泌一些酚類物質(zhì),在接觸空氣中的氧氣后,其會氧化為相應(yīng)的醌類物質(zhì),產(chǎn)生可見的茶色、褐色或黑色,此即謂“酚污染”。在木本植物,尤其是熱帶木本植物及少量草本植物中,此現(xiàn)象較為嚴重。
常用的防治措施如下:
1、試用抗酚類氧化的藥劑(半胱氨酸及其鹽酸鹽、二硫蘇糖醇、谷胱甘肽、抗壞血酸等。該類藥劑一般需用濃度為50-200mg/L。用經(jīng)過濾滅菌的藥液洗滌剛切割的外植體傷口表面,或加入固體培養(yǎng)基的表層,或?qū)偳懈畹耐庵搀w浸入其中一定時間)
2、適當降低培養(yǎng)基溫度。
3、接種后先進行一定時間的暗培養(yǎng)。
4、及時轉(zhuǎn)接入新鮮培養(yǎng)基。
5、選擇切取外植體部位等。
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